血清是檢體中最常見樣本,如抗體、生化、激素、血藥濃度等項(xiàng)目均需要用到血清,然而其質(zhì)量確實(shí)是不可忽視的問題,溶血、脂血、黃疸都會(huì)一定程度上影響檢測(cè)結(jié)果。
有關(guān)血清樣本分離及常見問題
分析如下
1. 全血采集
量約為要求血清量的2-2.5倍(如:血清要求1ml,需采集全血2-2.5ml)
2. 血清分離
全血存放的容器決定分離的是血清還是血漿;促凝管和空白管存放全血經(jīng)血液凝固后離心分出的上清是血清;若放入EDTA抗凝管或者肝素抗凝管,離心后分出的上清稱為血漿(如圖1)
備注:血清主要區(qū)別于血漿的是有血液凝固的過程和纖維蛋白的析出
▼ 圖1 血清和血漿的分離
3. 血漿是否可以替代血清進(jìn)行送檢?
多數(shù)項(xiàng)目中血漿樣本可以替代血清,前提是該檢測(cè)項(xiàng)目不受抗凝劑成分和凝血因子的影響(如抗體類項(xiàng)目),但生化項(xiàng)目則不可用EDTA抗凝分離血漿,因?yàn)镋DTA-2K此種抗凝劑不僅可以絡(luò)合重金屬M(fèi)g2+,也會(huì)致使K+的含量上升,故生化項(xiàng)目的最佳樣本是血清
4.什么樣的血清樣本不合格?
溶血、脂血(乳糜血)、黃疸(若是病理性原因很難消除)屬于不合格的樣本(如圖2)
▲ 圖2 不合格的血清樣本
5. 溶血產(chǎn)生的因素?
1)擦拭皮膚時(shí)酒精使用量過大和采血部位按壓用力;
2)動(dòng)物保定不當(dāng),多次進(jìn)針或進(jìn)針后針頭位置調(diào)整;
3)血液在注射器中已經(jīng)發(fā)生凝固或者帶著注射器針頭將血液轉(zhuǎn)移至采血管中;
4)采血管內(nèi)有氣泡產(chǎn)生(多次采集的血液放在同一個(gè)分離管內(nèi)等原因);
5)空白管分離全血時(shí),靜置時(shí)間過短,纖維蛋白不能及時(shí)析出而使血清呈膠凍樣,抽取時(shí)帶動(dòng)紅細(xì)胞;
6)離心轉(zhuǎn)速過高或過低,最高不宜超過5000rpm,最佳采用3000-3800rpm 10 min;
7)抽取上清時(shí),微量紅細(xì)胞被吸取。
6. 脂血怎么改善?(▼ 如圖3)
7. 黃疸的產(chǎn)生多為病理性或者服用藥物(如維生素B組)的原因,病理性的難以改變血清質(zhì)量,藥物性原因可以通過停藥改善血清質(zhì)量
8. 血清質(zhì)量是怎樣影響檢測(cè)的?
1)溶血:紅細(xì)胞的破裂會(huì)引起血漿成分的改變,對(duì)一些生化項(xiàng)目如谷草轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶、鉀的測(cè)定結(jié)果造成較大的影響。若進(jìn)行抗體類檢測(cè)本身血清的顏色會(huì)干擾到最終的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
2)脂血:在運(yùn)用比色法和比濁法檢測(cè)的項(xiàng)目中,脂血中的乳糜微粒具有散射光的特性不能通過雙波長進(jìn)行消除從而影響檢測(cè)結(jié)果。
3)黃疸:黃疸的血清中含有膽紅素,若樣本放置時(shí)間過長或通過氧化劑后膽紅素還可被氧化為膽綠素、膽褐素,這些色素在不同波長范圍具有一定的光吸收,從而影響檢驗(yàn)結(jié)果。
結(jié)語:
全血、血清和血漿2-8℃冷藏保存,如不能及時(shí)送檢需冷凍存放,部分檢測(cè)項(xiàng)目要求冷凍送檢(詳見檢測(cè)項(xiàng)目表)
合格的樣本是保證精準(zhǔn)檢測(cè)的前提,提高檢體質(zhì)量是確保檢測(cè)結(jié)果的重要基礎(chǔ)